目錄
前言
第一篇 實(shí)驗(yàn)要求
第一章 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本要求 1
第一節(jié) 生化實(shí)驗(yàn)室學(xué)生實(shí)驗(yàn)守則 1
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室安全及防護(hù)知識(shí) 1
第三節(jié) 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 3
第二篇 實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理與基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)
第二章 生物物質(zhì)的定性鑒定 7
第一節(jié) 氨基酸和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)及性質(zhì) 7
第二節(jié) 核酸的結(jié)構(gòu)組成特點(diǎn) 10
第三節(jié) 糖的基本性質(zhì) 12
第四節(jié) 酶的催化特性 13
第五節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分 15
實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)的雙縮脲反應(yīng) 15
實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)和氨基酸的茚三酮反應(yīng) 17
實(shí)驗(yàn)三 蛋白質(zhì)的黃色反應(yīng) 19
實(shí)驗(yàn)四 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng) 20
實(shí)驗(yàn)五 蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)及等電點(diǎn)的測(cè)定 24
實(shí)驗(yàn)六 酵母RNA的提取與鑒定 26
實(shí)驗(yàn)七 糖的呈色反應(yīng)及還原糖的檢測(cè) 29
實(shí)驗(yàn)八 淀粉酶的激活劑抑制劑及其特異性分析 33
實(shí)驗(yàn)九 肌糖原的酵解作用研究 36
實(shí)驗(yàn)十 生物氧化作用研究 38
第三章 紙層析技術(shù) 42
第一節(jié) 紙層析基本原理 42
第二節(jié) 影響相對(duì)遷移率的主要因素 43
第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分 45
實(shí)驗(yàn)一 氨基酸的紙層析分離 45
實(shí)驗(yàn)二 紙層析法檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性 47
第四章 薄層層析技術(shù) 50
第一節(jié) 薄層層析原理 50
第二節(jié) 固定相支持介質(zhì)的選擇 51
第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分 53
實(shí)驗(yàn)一 硅膠薄層層析法分離鑒定水果中的糖類(lèi)物質(zhì) 53
實(shí)驗(yàn)二 DEAE-纖維素薄層層析分離鑒定核苷酸 55
第五章 離子交換層析技術(shù) 58
第一節(jié) 離子交換層析原理 58
第二節(jié) 核酸蛋白質(zhì)檢測(cè)儀的構(gòu)造及使用 63
第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分 64
實(shí)驗(yàn)一 離子交換法制備無(wú)離子水 64
實(shí)驗(yàn)二 DEAE-Cellulose柱層析分離純化大蒜超氧化物歧化酶 67
第六章 凝膠過(guò)濾層析技術(shù) 72
第一節(jié) 凝膠過(guò)濾層析原理 72
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分 78
實(shí)驗(yàn)一 分子篩過(guò)濾層析脫鹽 78
實(shí)驗(yàn)二 分子篩層析法分離蛋白質(zhì)及相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定 80
第七章 親和層析技術(shù) 84
第八章 離心技術(shù) 89
第九章 分光光度技術(shù) 94
第一節(jié) 分光光度技術(shù)的原理 94
第二節(jié) 分光光度計(jì)的構(gòu)造及使用 97
第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分 100
實(shí)驗(yàn)一 雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 100
實(shí)驗(yàn)二 Folin-酚試劑法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度 102
實(shí)驗(yàn)三 紫外吸收法測(cè)定蚯蚓提取液的蛋白質(zhì)含量 104
實(shí)驗(yàn)四 考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度 106
實(shí)驗(yàn)五 花椰菜DNA的提取與二苯胺法測(cè)定DNA的含量 108
實(shí)驗(yàn)六 植物組織中可溶性糖含量的測(cè)定（蒽酮比色法） 111
實(shí)驗(yàn)七 兔肝轉(zhuǎn)氨酶活力測(cè)定 113
實(shí)驗(yàn)八 酵母發(fā)酵過(guò)程中無(wú)機(jī)磷的利用（定磷法） 116
第十章 電泳技術(shù) 119
第一節(jié) 電泳的基本原理 119
第二節(jié) 電泳的分類(lèi) 121
第三節(jié) 常用的電泳技術(shù) 122
第四節(jié) 染色方法 133
第五節(jié) 電泳有關(guān)的儀器及使用 135
第六節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分 137
實(shí)驗(yàn)一 醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白 137
實(shí)驗(yàn)二 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離大蒜超氧化物歧化酶 139
實(shí)驗(yàn)三 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定超氧化物歧化酶的相對(duì)分子質(zhì)量 143
實(shí)驗(yàn)四 等電聚焦電泳法測(cè)定雞卵類(lèi)黏蛋白的等電點(diǎn) 146
第十一章 蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù) 149
第一節(jié) 蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)原理 149
第二節(jié) 抗血清的制備 153
第十二章 滴定技術(shù) 159
第一節(jié) 概述 159
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分 160
實(shí)驗(yàn)一 溫度、pH對(duì)糖化酶活力的影響 160
實(shí)驗(yàn)二 果蔬中維生素5的定量測(cè)定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 163
第三篇 綜合性實(shí)驗(yàn)
十三章 實(shí)驗(yàn)舉例 167
實(shí)驗(yàn)一 微量凱氏定氮法測(cè)定牛奶蛋白質(zhì)含量 167
實(shí)驗(yàn)二 雞卵類(lèi)黏蛋白的分離純化活性及相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定 172
實(shí)驗(yàn)三 蛋白質(zhì)免疫印跡檢測(cè)小鼠肝臟脾臟及血液超氧化物歧化酶 179
實(shí)驗(yàn)四 胰蛋白酶米氏常數(shù)及最大反應(yīng)速度的測(cè)定 183
實(shí)驗(yàn)五 胰蛋白酶的固定化及其性質(zhì) 186
實(shí)驗(yàn)六 親和層析純化蚯蚓絲氨酸蛋白酶 191
實(shí)驗(yàn)七 植物過(guò)氧化物同工酶提取活性測(cè)定及電泳鑒定 196
實(shí)驗(yàn)八 大豆多糖的提取及測(cè)定 199
實(shí)驗(yàn)九 定磷法測(cè)定酵母核糖核酸的含量 203
實(shí)驗(yàn)十 小鼠肝臟DNA的提取及測(cè)定 207
實(shí)驗(yàn)十一 兔肝總RNA的提取及R-PCR 210
參考文獻(xiàn) 215
附錄一 常用標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和標(biāo)定 216
附錄二 常用緩沖液的配制方法 220
附錄三 硫酸銨飽和度的調(diào)整用表 225
附錄四 柱層析材料 227