《動物生物化學(xué)實驗(畜牧獸醫(yī)類高等學(xué)校規(guī)劃教材)》編著者羅獻(xiàn)梅、甘玲。動物生物化學(xué)實驗是動物科學(xué)和動物醫(yī)學(xué)等專業(yè)學(xué)生的專業(yè)基礎(chǔ)課,是培養(yǎng)相關(guān)專業(yè)的大學(xué)生實驗技能的重要課程之一。為使學(xué)生對當(dāng)前常用的動物生化技術(shù)有較全面的了解,本教材先介紹動物生物化學(xué)實驗概論,然后按照各種技術(shù)(離心技術(shù)、光譜技術(shù)、電泳技術(shù)、生物大分子的分離制備技術(shù)、層析技術(shù)、免疫技術(shù)、核酸技術(shù)等)分章節(jié)編排,每章先介紹該種技術(shù)的實驗原理,然后就該種實驗技術(shù)選擇了一些代表性強(qiáng)、取材于動物的組織器官進(jìn)行實驗。目的在于通過系統(tǒng)實驗使學(xué)生懂得這些實驗技術(shù)的基本原理,掌握基本的操作,提高學(xué)生動手能力。全書編排的實驗較多,各個院校可根據(jù)各校的實際情況選擇使用。
第一章 動物生物化學(xué)實驗概論
第一節(jié) 生物化學(xué)實驗基礎(chǔ)
第二節(jié) 動物生物化學(xué)基礎(chǔ)實驗舉例
實驗一 常用實驗樣品的處理及制備
實驗二 蛋白質(zhì)的雙縮脲反應(yīng)
實驗三 微量凱氏定氮法測定牛奶蛋白質(zhì)含量
實驗四 蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)及等電點的測定
實驗五 唾液淀粉酶活性的觀察
實驗六 脂肪酸的B一氧化一酮體測定
實驗七 蛋白質(zhì)的鹽析和透析
第二章 離心技術(shù)
第一節(jié) 離心技術(shù)原理
第二節(jié) 離心技術(shù)實驗舉例
實驗一 牛乳蛋白質(zhì)的提取與鑒定
實驗二 肝糖原的提取與鑒定
第一章 動物生物化學(xué)實驗概論
第一節(jié) 生物化學(xué)實驗基礎(chǔ)
第二節(jié) 動物生物化學(xué)基礎(chǔ)實驗舉例
實驗一 常用實驗樣品的處理及制備
實驗二 蛋白質(zhì)的雙縮脲反應(yīng)
實驗三 微量凱氏定氮法測定牛奶蛋白質(zhì)含量
實驗四 蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)及等電點的測定
實驗五 唾液淀粉酶活性的觀察
實驗六 脂肪酸的B一氧化一酮體測定
實驗七 蛋白質(zhì)的鹽析和透析
第二章 離心技術(shù)
第一節(jié) 離心技術(shù)原理
第二節(jié) 離心技術(shù)實驗舉例
實驗一 牛乳蛋白質(zhì)的提取與鑒定
實驗二 肝糖原的提取與鑒定
實驗三 琥珀酸脫氫酶的作用及其競爭性抑制的觀察
第三章 光譜技術(shù)
第一節(jié) 分光光度技術(shù)的原理
第二節(jié) 光譜技術(shù)實驗舉例
實驗一 血清總脂測定
實驗二 血液中葡萄糖的測定(鄰甲苯胺法)
實驗三 血液中葡萄糖濃度的測定(福林一吳憲(Folin—wu)氏法)
實驗四 血液非蛋白氮(NPN)的測定
實驗五 考馬斯亮藍(lán)染色法(Bradforcd法)測定蛋白質(zhì)濃度
實驗六 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT、GOT)活性的測定——賴氏法
實驗七 兔肝轉(zhuǎn)氨酶活力測定
實驗八 血清游離脂肪酸的測定
實驗九 Folin-酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質(zhì)濃度
實驗十 紫外吸收法測定牛血清白蛋白含量
實驗十一 紫外吸收法測定核酸含量
第四章 電泳技術(shù)
第一節(jié) 電泳的基本原理
第二節(jié) 電泳技術(shù)實驗舉例
實驗一 醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白
實驗二 瓊脂糖凝膠電泳法分離乳酸脫氫酶同丁酶
實驗三 瓊脂糖凝膠電泳法分離核酸
實驗四 SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳測定超氧化物歧化酶的相對分子質(zhì)量
實驗五 等電聚焦電泳法測定雞卯類黏蛋白的等電點
第五章 生物大分子的分離制備技術(shù)
第一節(jié) 生物大分子分離制備的基本知識
第二節(jié) 生物大分子分離制備實驗舉例
實驗一 血漿IgG的分離純化
實驗二 細(xì)胞色素c的制備
實驗三 雞卵黏蛋白的制備
實驗四 豬胰蛋白酶的制備
實驗五 動物組織中DNA的制備
實驗六 動物組織中總RNA及cDNA的制備
第六章 層析技術(shù)
第一節(jié) 層析技術(shù)基本原理
第二節(jié) 層析技術(shù)實驗舉例
實驗一氨基酸的分離鑒定——薄層層析法
實驗二紙層析法檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性
實驗三離子交換法純化血清IgG
實驗四親和層析法純化胰蛋白酶
第七章 免疫化學(xué)技術(shù)
第一節(jié) 免疫化學(xué)技術(shù)原理
第二節(jié) 免疫技術(shù)實驗舉例
實驗一抗血清的制備
實驗二雙向免疫擴(kuò)散法測定抗血清效價
實驗三酶聯(lián)免疫吸附法測定血清中IgG
實驗四免疫熒光法觀察甲胎蛋白在人胎肝細(xì)胞中的分布
實驗五Western印跡法鑒定牛血清Igc
第八章 核酸技術(shù)
第一節(jié) 核酸技術(shù)原理
第二節(jié) 核酸技術(shù)實驗舉例
實驗一 動物基因組DNA的提取及質(zhì)量鑒定
實驗二 PcR技術(shù)
實驗二 三RNA的提取及鑒定
實驗四 質(zhì)粒DNA的提取、純化及驗證
附錄
附錄a 實驗室常用數(shù)據(jù)表
附錄b 常用緩沖液的配制方法
附錄c 常用核酸、蛋白質(zhì)換算數(shù)據(jù)
附錄d 硫酸銨飽和度常用表
附錄e 層析技術(shù)常用數(shù)據(jù)
附錄f 動物生物化學(xué)相關(guān)專業(yè)部分網(wǎng)址
參考文獻(xiàn)