目錄
前言
第1章 基因及基因組學(xué)檢測技術(shù) 1
1.1 核酸制品的理化指標(biāo)及其檢測 1
1.1.1 核酸分離純化的原則 1
1.1.2 核酸分離純化的技術(shù)路線 2
1.1.3 基因組DNA的分離與純化 3
1.1.4 質(zhì)粒DNA的分離與純化 4
1.1.5 RNA的分離與純化 4
1.1.6 全白動核酸提取純化工作站 5
1.2 DNA的變性與復(fù)性及其Tm值和Cot值測定 6
1.2.1 DNA變性及其Tm值的意義與測定 6
1.2.2 DNA復(fù)性及其Cot值的意義和測定 7
1.2.3 核酸雜交分析及核酸探針技術(shù) 8
1.3 常規(guī)PCR原理與步驟 9
1.3.1 PCR的基本原理 9
1.3.2 操作過程 9
1.3.3 熱穩(wěn)定性DNA聚合酶 10
1.3.4 PCR引物的設(shè)計 10
1.3.5 PCR擴(kuò)增的模板 10
1.3.6 常規(guī)的PCR擴(kuò)增方案 10
1.4 實時熒光定量PCR檢測技術(shù) 11
1.4.1 CT值 12
1.4.2 熒光信號和定量數(shù)據(jù)的歸一化 14
1.4.3 污染的預(yù)防和熱啟動 14
1.4.4 標(biāo)準(zhǔn) 14
1.4.5 TaqMan探針技術(shù)原理 15
1.4.6 SYBR Green I熒光染料 15
1.4.7 定量PCR儀 16
1.5 其他非常規(guī)擴(kuò)增技術(shù) 16
1.6 核酸的序列測定技術(shù) 18
1.6.1 雙脫氧末端終止法測序 18
1.6.2 全自動測序 20
1.6.3 測序策略 21
1.6.4 高通量測序 22
1.7 基因組學(xué)檢測技術(shù) 24
1.7.1 結(jié)構(gòu)基因組學(xué)檢測技術(shù) 24
1.7.2 功能基因組學(xué)檢測技術(shù) 25
1.7.3 比較基因組學(xué)檢測技術(shù) 26
1.7.4 宏基因組學(xué)檢測技術(shù) 26
主要參考文獻(xiàn) 27
第2章 蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)組學(xué)檢測技術(shù) 28
2.1 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) 29
2.2 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定 31
2.2.1 水解分析 31
2.2.2 蛋白質(zhì)分子中末端氨基酸的分析 32
2.2.3 質(zhì)譜測序 34
2.2.4 蛋白質(zhì)的非共價復(fù)合物研究 35
2.3 蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)分析測定 35
2.3.1 儀器分析方法 35
2.3.2 理論分析方法 37
2.4 蛋白質(zhì)組學(xué)檢測技術(shù) 46
2.4.1 電泳分析法 47
2.4.2 層析技術(shù) 47
2.4.3 質(zhì)譜技術(shù) 48
2.4.4 蛋白質(zhì)修飾及其分析方法 52
主要參考文獻(xiàn) 55
第3章 酶檢測技術(shù) 56
3.1 基礎(chǔ)酶學(xué)檢測技術(shù) 56
3.1.1 酶反應(yīng)的解析 56
3.1.2 酶學(xué)常數(shù)測定 57
3.2 應(yīng)用酶學(xué)檢測技術(shù) 66
3.2.1 酶產(chǎn)品質(zhì)檢 66
3.2.2 酶法檢測 79
3.2.3 常見酶活力測定方法 85
主要參考文獻(xiàn) 103
第4章 次生活性成分檢測技術(shù) 104
4.1 生物堿 104
4.1.1 生物堿的分類 104
4.1.2 生物堿的理化性質(zhì) 105
4.1.3 生物堿的提取分離 106
4.1.4 生物堿定性鑒別 109
4.1.5 生物堿的含量測定 111
4.2 醌類化合物 114
4.2.1 醌類化合物的主要理化特性 115
4.2.2 醌類化合物的提取分離 116
4.2.3 醌類化合物的定性鑒別 117
4.2.4 醌類化合物的含量測定 119
4.2.5 蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)測定 120
4.3 黃酮類化合物 123
4.3.1 黃酮類化合物的主要理化特性 123
4.3.2 黃酮類化合物的分離 123
4.3.3 黃酮類化合物的定性鑒別 125
4.3.4 黃酮類化合物的定量分析 127
4.4 香豆素和木脂素類 130
4.4.1 香豆素類成分的主要理化性質(zhì) 130
4.4.2 香豆素類的提取分離 131
4.4.3 香豆素類的檢識 132
4.4.4 木脂素類的理化性質(zhì) 132
4.4.5 木脂素類的提取分離 132
4.4.6 木脂素類的檢識 133
4.5 皂苷類 133
4.5.1 皂苷的性質(zhì) 133
4.5.2 皂苷的提取分離 134
4.5.3 皂苷類成分的定性分析 135
4.5.4 皂苷類成分的定量分析 136
4.6 強(qiáng)心苷類 137
4.6.1 強(qiáng)心苷類的主要性質(zhì) 137
4.6.2 強(qiáng)心苷類的檢識反應(yīng) 139
4.6.3 強(qiáng)心苷類的提取分離 140
4.7 揮發(fā)油 141
4.7.1 揮發(fā)油的主要性質(zhì) 141
4.7.2 揮發(fā)油成分的提取 141
4.7.3 揮發(fā)油成分的分離 142
4.7.4 揮發(fā)油的鑒定 M3
4.8 抗生素 143
4.8.1 抗生素的種類 143
4.8.2 抗生素的效價測定 144
主要參考文獻(xiàn) 147
第5章 細(xì)胞分析檢測技術(shù) 148
5.1 細(xì)胞的分離與培養(yǎng) 148
5.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的特點與應(yīng)用 148
5.1.2 培養(yǎng)細(xì)胞生長的條件 149
5.1.3 原代培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離 150
5.2 細(xì)胞形態(tài)與活性的常規(guī)檢測法 151
5.2.1 普通顯微染色觀察法 151
5.2.2 MTT法 153
5.3 數(shù)字顯微及激光共聚焦顯微分析法 155
5.3.1 數(shù)字顯微分析法 155
5.3.2 激光掃描共聚焦顯微觀察分析法 155
5.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測技術(shù) 158
5.4.1 流式細(xì)胞術(shù)的發(fā)展簡史 158
5.4.2 流式細(xì)胞術(shù)的基本結(jié)構(gòu)和工作原理 159
5.4.3 流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用 165
主要參考文獻(xiàn) 168
第6章 功效與代謝檢測技術(shù) 169
6.1 保健食品功效檢測與評價 169
6.1.1 保健食品概述 169
6.1.2 保健食品功能檢測 171
6.2 藥理檢測技術(shù) 183
6.2.1 藥效學(xué)檢測技術(shù) 183
6.2.2 藥物代謝動力學(xué)檢測技術(shù) 191
主要參考文獻(xiàn) 198
第7章 生物安全評價方法與技術(shù) 199
7.1 生物安全性評價基本方法 199
7.1.1 急性毒性試驗 199
7.1.2 蓄積毒性試驗 199
7.1.3 亞急性毒性試驗 200
7.1.4 慢性毒性試驗 201
7.1.5 致癌試驗 203
7.1.6 致突變試驗 204
7.1.7 代謝試驗 205
7.2 各主要制品生物安全性評價 205
7.2.1 食品安全性評價 205
7.2.2 藥物毒理及安全性評價 207
7.2.3 化妝品毒理及安全性評價 212
7.2.4 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性評價 222
7.3 質(zhì)量安全認(rèn)證 223
7.3.1 HACCP認(rèn)證 223
7.3.2 GMP認(rèn)證 224
7.3.3 QS認(rèn)證 226
7.3.4 其他與生物技術(shù)產(chǎn)品相關(guān)的認(rèn)證 228
主要參考文獻(xiàn) 228
第8章 生物傳感器及生物芯片技術(shù) 229
8.1 生物傳感器 229
8.1.1 生物傳感器的結(jié)構(gòu)和原理 230
8.1.2 生物傳感器的定義與分類 230
8.1.3 幾種主要的生物傳感器 230
8.2 生物芯片 237
8.2.1 生物芯片的制造 238
8.2.2 生物芯片的使用和閱讀 241
8.2.3 各種生物芯片 244
8.2.4 生物芯片的應(yīng)用 247
主要參考文獻(xiàn) 249