流式細胞術(shù)是現(xiàn)代生物學和醫(yī)學的常用技術(shù)，一經(jīng)發(fā)明就被逐漸應(yīng)用到細胞生物學、免疫學、發(fā)育生物學、生理學、植物學、分子生物學等基礎(chǔ)研究，醫(yī)學的臨床診斷和治療，以及農(nóng)林畜牧養(yǎng)殖、藥品檢驗、食品檢驗、環(huán)境檢測等廣泛的領(lǐng)域。
作者結(jié)合十多年的流式經(jīng)驗，注重理論和實際、基礎(chǔ)和應(yīng)用相結(jié)合，重點介紹了流式細胞術(shù)的原理、技術(shù)及方法，及時跟蹤展現(xiàn)了其最新成果和發(fā)展趨勢。書中列舉了大量有代表性的應(yīng)用實例，詳細描述了其操作過程、實驗結(jié)果及詳盡的分析方法等，可為相關(guān)領(lǐng)域的科研和技術(shù)人員提供有力的技術(shù)支持。《流式細胞術(shù)（第二版）》可操作性強，圖文并茂。在第一版基礎(chǔ)上，（1）新版的部分章節(jié)改用了彩色圖譜，更便于讀者使用；（2）增加了“細胞增殖與死亡的檢測”一章，詳細描述流式細胞術(shù)在具體實驗中的應(yīng)用方法；（3）各章節(jié)中都及時添加了最新進展和方法。
《流式細胞術(shù)（第二版）》可作為高校生物、醫(yī)學、農(nóng)林等高年級本科生、研究生教材，也可供科研人員和檢驗人員參考。
馮仁青，北京大學生命科學學院副教授,曾出版《現(xiàn)代抗體技術(shù)及其應(yīng)用》等教材；杜立穎，北京大學生命科學學院實驗技師。
第一章 概述
第一節(jié) 什么是流式細胞術(shù)？
第二節(jié) 流式細胞術(shù)能做什么？
第三節(jié) 背景與回顧
第四節(jié) 儀器簡介
一、 BD公司
二、 Beckman Coulter公司
三、 ABI公司
四、 Union Biometrica公司
五、 Apogee 公司
六、 Partec公司
七、 Merck Millipore公司
第五節(jié) 前景與展望
一、 流式細胞術(shù)與顯微技術(shù)結(jié)合
二、 流式細胞術(shù)與質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合 第一章 概述
第一節(jié) 什么是流式細胞術(shù)？
第二節(jié) 流式細胞術(shù)能做什么？
第三節(jié) 背景與回顧
第四節(jié) 儀器簡介
一、 BD公司
二、 Beckman Coulter公司
三、 ABI公司
四、 Union Biometrica公司
五、 Apogee 公司
六、 Partec公司
七、 Merck Millipore公司
第五節(jié) 前景與展望
一、 流式細胞術(shù)與顯微技術(shù)結(jié)合
二、 流式細胞術(shù)與質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合
參考文獻
第二章 流式細胞術(shù)原理
第一節(jié) 工作原理
第二節(jié) 液流系統(tǒng)
一、 鞘液
二、 噴嘴
三、 流式照射室
第三節(jié) 光學檢測系統(tǒng)
一、 激光和熒光
二、 激光照射液流
三、 光學信號
四、 光學元件
五、 光學信號檢測系統(tǒng)
第四節(jié) 電子控制系統(tǒng)
一、 光電檢測器
二、 通道
三、 閾值
小結(jié)
參考文獻
第三章 數(shù)據(jù)儲存與分析系統(tǒng)
第一節(jié) 數(shù)據(jù)儲存
第二節(jié) 數(shù)據(jù)分析
一、 常用術(shù)語
二、 流式圖譜的表現(xiàn)形式
三、 熒光補償
第三節(jié) 數(shù)據(jù)分析實例
實例一： 雙參數(shù)FSC/SSC分析
實例二： 三參數(shù)FSC/SSC/FL1分析
實例三： 四參數(shù)FSC/SSC/FL1/FL2簡單樣本分析
實例四： 四參數(shù)FSC/SSC/FL1/FL2復雜樣本分析
小結(jié)
參考文獻
第四章 細胞分選
第一節(jié) 細胞分選的原理
一、 液滴形成
二、 延遲時間
三、 液滴充電與偏轉(zhuǎn)
四、 液滴的收集
第二節(jié) 影響分選的因素
一、 分選速度
二、 分選門的設(shè)定
三、 分選模式
第三節(jié) 分選的質(zhì)量控制與評價
一、 分選的準確性
二、 分選的效率
三、 無菌分選
四、 分選對細胞活性的影響
第四節(jié) 分選前的準備
一、 分選用細胞的制備要求
二、 準備的材料
三、 分選時需要考慮的幾個問題
第五節(jié) 細胞分選的應(yīng)用實例
實例一： 單細胞分選
實例二： 回收極低比例（<0.01%）的細胞
實例三： 純化穩(wěn)定的細胞系
實例四： 淋巴細胞分選
實例五： 組織特異性干細胞分選
實例六： 染料排異性干細胞分選
實例七： 精子分選
小結(jié)
參考文獻
第五章 細胞表面標志的檢測
第一節(jié) 血液細胞的檢測
第二節(jié) 細胞表面標志的染色技術(shù)
一、 細胞表面分化抗原
二、 直接染色法和間接染色法
第三節(jié) 對照的設(shè)置
一、 陰性對照
二、 同型對照
三、 陽性對照
四、 熒光補償
第四節(jié) 定量測定
一、 外標法
二、 內(nèi)標法
三、 標準曲線法
四、 分辨率
第五節(jié) 設(shè)門的策略
一、 設(shè)門
二、 檢驗門
三、 熒光設(shè)門
四、 多色流式分析實例
小結(jié)
參考文獻
第六章 細胞內(nèi)成分的檢測
第一節(jié) 流式細胞術(shù)檢測細胞內(nèi)蛋白的特點
第二節(jié) 細胞內(nèi)蛋白染色通則
一、 細胞內(nèi)蛋白染色的步驟
二、 細胞內(nèi)蛋白染色應(yīng)遵循的原則
第三節(jié) 磷酸化蛋白的檢測
一、 固定和通透細胞
二、 熒光抗體染色
三、 優(yōu)化染色方法
四、 多種磷酸化蛋白同時檢測
第四節(jié) 細胞因子的檢測
一、 T淋巴細胞的細胞因子檢測
二、 單核細胞的細胞因子檢測
三、 細胞內(nèi)蛋白檢測的優(yōu)缺點
第五節(jié) 微球免疫測定法
一、 CBA方法的原理
二、 CBA方法的流程
三、 CBA方法的檢測范圍
四、 CBA方法的優(yōu)缺點
第六節(jié) 磷酸化蛋白與DNA同時檢測
小結(jié)
參考文獻
第七章 細胞核成分的檢測
第一節(jié) 常用的DNA染料
第二節(jié) 細胞周期
一、 細胞周期的定量分析方法
二、 粘連細胞的分析
三、 畫門方法
四、 BrdU/PI雙參數(shù)分析細胞周期
第三節(jié) 細胞周期的動態(tài)分析
一、 BrdU/PI雙參數(shù)檢測
二、 Hoechst/PI雙參數(shù)檢測
第四節(jié) DNA總量分析和倍體分析
一、 DNA總量分析
二、 正常生物體的倍體分析
三、 腫瘤細胞的非整倍體分析
四、 植物倍體的分析
第五節(jié) 細胞同步化
一、 自然同步化
二、 人工同步化
第六節(jié) DNA與RNA同時檢測
一、 吖啶橙（AO）同時檢測DNA與RNA
二、 Hoechst 33342/Pyronin Y同時檢測DNA和RNA
第七節(jié) DNA與蛋白質(zhì)同時檢測
一、 DNA和總蛋白同時檢測
二、 DNA和細胞周期蛋白同時檢測
第八節(jié) 染色體分析
小結(jié)
參考文獻
第八章 細胞增殖與死亡的檢測
第一節(jié) 細胞增殖的檢測
第二節(jié) 細胞凋亡的檢測
一、 散射光的檢測
二、 caspases酶檢測
三、 線粒體膜電位的檢測
四、 質(zhì)膜的檢測
五、 DNA檢測
六、 細胞衰老與端粒測定
第三節(jié) 壞死細胞的檢測
一、 散射光的檢測
二、 膜通透性的檢測
第四節(jié) 細胞凋亡、死亡檢測中存在的問題
一、 細胞凋亡的頻率可能與細胞死亡的發(fā)生率無關(guān)
二、 以DNA片段來估計細胞凋亡頻率的困難
三、 將凋亡小體或核碎片誤判為凋亡細胞
四、 細胞凋亡、細胞壞死、細胞凋亡的"壞死階段"
五、 樣品制備過程中凋亡細胞的選擇性丟失
六、 吞噬凋亡小體的活細胞偽裝成凋亡細胞
七、 商業(yè)試劑/試劑盒存在的問題
八、 細胞形態(tài)仍然是鑒定凋亡細胞的黃金標準
小結(jié)
參考文獻
第九章 流式細胞術(shù)的應(yīng)用概述
第一節(jié) 流式細胞術(shù)在生物學研究中的應(yīng)用
一、 在細胞生物學中的應(yīng)用
二、 在細胞周期研究和DNA倍體分析中的應(yīng)用
三、 在細胞凋亡分析中的應(yīng)用
四、 在染色體核型分析中的應(yīng)用
五、 在分子遺傳學中的應(yīng)用
六、 在免疫學中的應(yīng)用
七、 在植物學中的應(yīng)用
第二節(jié) 流式細胞術(shù)在醫(yī)學研究及臨床中的應(yīng)用
一、 在腫瘤學中的應(yīng)用
二、 在臨床細胞免疫學中的應(yīng)用
三、 在血液病治療中的應(yīng)用
四、 在血栓與出血性疾病治療中的應(yīng)用
五、 生物學領(lǐng)域的其他應(yīng)用
第三節(jié) 流式細胞術(shù)在農(nóng)林畜牧養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用
一、 在植物學中的應(yīng)用
二、 在家畜性別控制中的應(yīng)用
三、 在家畜疾病監(jiān)控與預(yù)防中的應(yīng)用
第四節(jié) 流式細胞術(shù)在微生物學中的應(yīng)用
一、 在病原微生物研究中的應(yīng)用
二、 在環(huán)境微生物研究中的應(yīng)用
第五節(jié) 流式細胞術(shù)在食品、藥品檢測方面的應(yīng)用
一、 在食品檢測中的應(yīng)用
二、 在藥品檢測中的應(yīng)用
第六節(jié) 流式細胞術(shù)新技術(shù)的應(yīng)用
一、 CBA方法
二、 定量流式細胞術(shù)
小結(jié)
參考文獻
第十章 樣本制備和染色方法
第一節(jié) 單細胞懸液的制備
一、 小鼠末梢血的采集和單細胞懸液的制備
二、 小鼠胸腺的分離和單細胞懸液的制備
三、 小鼠骨髓的采集和單細胞懸液的制備
四、 密度梯度離心法制備外周血單個核細胞懸液
五、 小鼠脾臟的分離和單細胞懸液的制備
六、 小鼠成體乳腺單細胞懸液的制備
七、 小鼠胰腺細胞懸液的制備
第二節(jié) 熒光素標記抗體的制備
一、 FITC/ Texas Red 標記
二、 生物素標記
三、 Allophycocyanin（APC）或者Phycoerythrin（PE）標記
第三節(jié) 分析和分選用的細胞染色
一、 流式分析用的細胞染色方法
二、 流式分選用的細胞染色方法
三、 SP細胞的染色方法
四、 流式分選用的精子染色方法
第四節(jié) 細胞內(nèi)分子染色
一、 常用的細胞固定方法
二、 細胞內(nèi)分子的染色方法
三、 細胞內(nèi)和細胞外分子同時染色的方法
第五節(jié) 細胞周期染色
一、 固定全細胞的PI染色方法
二、 非固定細胞的無洗染色方法
三、 BrdU染色方法
四、 植物細胞的DNA染色方法
第六節(jié) 細胞同步化實驗方法
一、 過剩胸腺嘧啶脫氧核苷法--S期細胞同步化
二、 羥基脲法--S期細胞同步化
三、 秋水仙胺法--M期細胞同步化
四、 血清饑餓法--G0期細胞同步化
五、 G1期和G2期細胞同步化實驗方法
第七節(jié) DNA和RNA同時染色
一、 Hoechst 33342/PY同時檢測DNA和RNA
二、 吖啶橙（AO）同時檢測DNA和RNA
第八節(jié) 細胞凋亡染色
一、 PI染色法--DNA凋亡峰的檢測
二、 Annexin V/PI雙染色法
三、 Hoechst 33342/PI雙染色法
四、 TUNEL染色法
小結(jié)
參考文獻
附錄
一、 流式細胞術(shù)相關(guān)網(wǎng)址
二、 流式細胞術(shù)相關(guān)實驗方法網(wǎng)址
三、 熒光素試劑公司
四、 熒光光譜網(wǎng)址
五、 熒光素激發(fā)和發(fā)射光譜一覽表
書單推薦
