目錄
叢書序
前言
第一章 緒論/1
第一節(jié) 臨床分子生物檢驗(yàn)學(xué)的概念/1
第二節(jié) 臨床分子生物檢驗(yàn)學(xué)的學(xué)科發(fā)展史/1
第三節(jié) 臨床分子生物檢驗(yàn)學(xué)的臨床應(yīng)用/2
一、感染性疾病的臨床分子生物檢驗(yàn)/2
二、遺傳病的臨床分子生物檢驗(yàn)/2
三、腫瘤的臨床分子生物檢驗(yàn)/2
四、無創(chuàng)產(chǎn)前篩查/3
五、移植配型/3
六、法醫(yī)物證鑒定/3
第四節(jié) 基因組與基因組學(xué)/3
一、基因組和基因組特征/4
二、基因組學(xué)/8
三、后基因組學(xué)/8
第二章 分子生物標(biāo)志物/10
第一節(jié) 分子生物標(biāo)志物的概念和分類/10
一、生物標(biāo)志物的概念和分類/10
二、分子生物標(biāo)志物的概念和分類/10
第二節(jié) 核酸分子生物標(biāo)志物/11
一、基于基因突變的核酸分子生物標(biāo)志物/12
二、基于基因多態(tài)性的核酸分子生物標(biāo)志物/13
三、基于DNA甲基化修飾的核酸分子生物標(biāo)志物/16
四、基于轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的核酸分子生物標(biāo)志物/17
五、基于線粒體DNA的核酸分子生物標(biāo)志物/18
六、基于循環(huán)核酸的核酸分子生物標(biāo)志物/19
七、基于外泌體的核酸分子生物標(biāo)志物/20
第三章 標(biāo)本的處理與核酸的分離純化/21
第一節(jié) 臨床分子生物檢驗(yàn)常見標(biāo)本及其處理/21
一、臨床分子生物檢驗(yàn)標(biāo)本的處理原則/21
二、常見標(biāo)本的處理/21
第二節(jié) 核酸分離純化的原則及技術(shù)路線/22
一、核酸分離純化的基本原則/22
二、核酸分離純化的技術(shù)路線/23
第三節(jié) DNA的分離純化/24
一、基因組DNA的分離純化/24
二、循環(huán)DNA的分離純化/26
三、線粒體DNA的分離純化/26
第四節(jié) RNA的分離純化/26
一、總RNA的分離純化/26
二、mRNA的分離純化/27
三、非編碼RNA的分離純化/27
第四章 核酸的分子生物檢驗(yàn)技術(shù)/28
第一節(jié) 核酸分子雜交技術(shù)/28
一、核酸探針及雜交信號(hào)的檢測(cè)/28
二、Southern印跡雜交/30
三、Northern印跡雜交/32
四、熒光原位雜交/32
五、基因芯片技術(shù)/34
第二節(jié) 核酸擴(kuò)增/37
一、PCR/37
二、熒光定量PCR/40
三、其他PCR衍生技術(shù)/45
第三節(jié) 核酸序列分析技術(shù)/46
一、第一代DNA測(cè)序技術(shù)/47
二、焦磷酸測(cè)序技術(shù)/48
三、新一代測(cè)序技術(shù)/49
四、測(cè)序策略及應(yīng)用/50
五、核酸數(shù)據(jù)庫/50
第五章 蛋白質(zhì)的分子生物檢驗(yàn)技術(shù)/52
第一節(jié) Western印跡雜交/52
一、概述/52
二、原理/52
三、特點(diǎn)/52
四、應(yīng)用/52
第二節(jié) 質(zhì)譜分析/53
一、概述/53
二、原理/53
三、特點(diǎn)/54
四、應(yīng)用/54
第三節(jié) 蛋白質(zhì)芯片/55
一、概述/55
二、原理與種類/55
三、特點(diǎn)/55
四、應(yīng)用/56
第四節(jié) 免疫共沉淀/56
一、概述/56
二、原理/56
三、特點(diǎn)/56
四、應(yīng)用/57
第五節(jié) GST pull-down技術(shù)/57
一、概述/57
二、原理/57
三、特點(diǎn)/57
四、應(yīng)用/57
第六節(jié) 其他技術(shù)/57
一、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定/57
二、免疫組化/58
三、凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)/58
四、染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)/58
第六章 感染性疾病的分子生物檢驗(yàn)/59
第一節(jié) 病毒的分子生物檢驗(yàn)/59
一、各型肝炎病毒的分子生物檢驗(yàn)/59
二、人類免疫缺陷病毒的分子生物檢驗(yàn)/62
三、人乳頭瘤病毒的分子生物檢驗(yàn)/63
四、其他常見致病病毒的分子生物檢驗(yàn)/64
第二節(jié) 細(xì)菌的分子生物檢驗(yàn)/64
一、結(jié)核分枝桿菌的分子生物檢驗(yàn)/65
二、淋球菌的分子生物檢驗(yàn)/65
三、霍亂弧菌的分子生物檢驗(yàn)/66
四、其他細(xì)菌的分子生物檢驗(yàn)/67
第三節(jié) 耐藥性的分子生物檢驗(yàn)/68
一、病毒性疾病耐藥性分析的分子生物檢驗(yàn)/69
二、細(xì)菌性疾病耐藥性分析的分子生物檢驗(yàn)/70
第四節(jié) 其他病原體的分子生物檢驗(yàn)/72
一、真菌的分子生物檢驗(yàn)/72
二、螺旋體、衣原體與支原體的分子生物檢驗(yàn)/72
三、寄生蟲的分子生物檢驗(yàn)/75
第七章 單基因遺傳病的分子生物檢驗(yàn)/76
第一節(jié) 單基因遺傳病基因突變及分類/76
一、單基因遺傳病發(fā)病的基因突變/76
二、單基因遺傳病的分類/76
第二節(jié) 單基因遺傳病的分子生物檢驗(yàn)/77
一、直接診斷策略/77
二、基因多態(tài)性連鎖分析/78
三、基因突變的定量診斷/78
四、分子生物檢驗(yàn)標(biāo)本/78
五、分子生物檢驗(yàn)中必須關(guān)注的幾個(gè)問題/78
第三節(jié) 鐮狀細(xì)胞貧血的分子生物檢驗(yàn)/79
一、鐮狀細(xì)胞貧血的遺傳學(xué)發(fā)病機(jī)制/79
二、鐮狀細(xì)胞貧血的基因分型/79
三、鐮狀細(xì)胞貧血的分子生物檢驗(yàn)/80
第四節(jié) 亨廷頓病的分子生物檢驗(yàn)/80
一、亨廷頓病致病基因的結(jié)構(gòu)與定位/81
二、亨廷頓病致病基因的變化特征/81
三、亨廷頓病的分子生物檢驗(yàn)/81
第五節(jié) 進(jìn)行性肌營(yíng)養(yǎng)不良的分子生物檢驗(yàn)/81
一、Dystrophin基因的結(jié)構(gòu)與定位/82
二、Dystrophin基因的突變特征/82
三、Duchenne肌營(yíng)養(yǎng)不良/Becker肌營(yíng)養(yǎng)
不良的分子生物檢驗(yàn)方法/82
第六節(jié) 脆性X綜合征的分子生物檢驗(yàn)/82
一、FMR1基因的結(jié)構(gòu)與定位/82
二、脆性X綜合征的基因突變特征/83
三、脆性X綜合征的分子生物檢驗(yàn)/83
第七節(jié) 產(chǎn)前診斷的分子生物檢驗(yàn)/83
第八章 腫瘤的分子生物檢驗(yàn)/85
第一節(jié) 腫瘤分子生物標(biāo)志物/85
一、癌基因/85
二、抑癌基因/85
三、細(xì)胞周期調(diào)節(jié) 基因/86
四、細(xì)胞凋亡相關(guān)基因/86
五、腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因/86
六、腫瘤血管生長(zhǎng)相關(guān)基因/87
七、腫瘤相關(guān)的表觀遺傳學(xué)異常/87
第二節(jié) 腫瘤分子生物檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用/88
一、乳腺癌/88
二、前列腺癌/89
三、結(jié)直腸癌/90
四、肺癌/91
第九章 分子生物檢驗(yàn)的其他臨床應(yīng)用/94
第一節(jié) 分子生物檢驗(yàn)在移植配型中的應(yīng)用/94
一、HLA的分子生物學(xué)特征/94
二、HLA分型技術(shù)與移植配型/95
三、HLA分型技術(shù)的臨床應(yīng)用/97
第二節(jié) 分子生物檢驗(yàn)在法醫(yī)物證學(xué)中的應(yīng)用/98
一、個(gè)體識(shí)別/98
二、親子鑒定/100
第十章 臨床分子生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制/103
第一節(jié) 臨床分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境與人員/103
一、臨床分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的分區(qū)規(guī)劃設(shè)計(jì)/103
二、臨床分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可與驗(yàn)收/103
三、臨床分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室人員資質(zhì)/103
第二節(jié) 檢驗(yàn)前質(zhì)量控制/103
一、儀器設(shè)備管理與定期校準(zhǔn)和維護(hù)/104
二、試劑盒的質(zhì)量檢驗(yàn)/104
三、耗材的質(zhì)量檢驗(yàn)/104
四、臨床標(biāo)本采集/105
五、臨床標(biāo)本運(yùn)送與保存/106
第三節(jié) 檢驗(yàn)中質(zhì)量控制/106
一、核酸分離純化質(zhì)量控制/106
二、核酸擴(kuò)增有效性質(zhì)量控制/106
第四節(jié) 檢驗(yàn)后質(zhì)量控制/107
一、檢驗(yàn)結(jié)果的審核和報(bào)告/107
二、檢驗(yàn)咨詢服務(wù)和實(shí)驗(yàn)室與臨床溝通/107
第五節(jié) 室內(nèi)質(zhì)量控制與質(zhì)控品/107
一、質(zhì)控品要求/107
二、質(zhì)控品類型/108
三、質(zhì)量控制統(tǒng)計(jì)分析/108
第六節(jié) 室間質(zhì)量評(píng)價(jià)/109
第七節(jié) 臨床分子生物檢驗(yàn)的主要污染源與防污染措施/110
一、主要污染源/110
二、防污染措施/110
第十一章 臨床分子生物檢驗(yàn)學(xué)實(shí)驗(yàn)/111
實(shí)驗(yàn)一 基因組DNA的分離與純化/111
實(shí)驗(yàn)二 質(zhì)粒DNA的分離與純化/113
實(shí)驗(yàn)三 PCR（SRY基因檢測(cè)）/116
實(shí)驗(yàn)四 Western印跡雜交/118
實(shí)驗(yàn)五 質(zhì)粒DNA的限制性核酸內(nèi)切酶酶切反應(yīng)/122
實(shí)驗(yàn)六 DNA片段的回收/123
實(shí)驗(yàn)七 DNA的重組連接（TA克隆連接）/124
實(shí)驗(yàn)八 感受態(tài)細(xì)胞的制備與轉(zhuǎn)化/126
實(shí)驗(yàn)九 重組質(zhì)粒的篩選與鑒定/128
實(shí)驗(yàn)十 HBV DNA的分子生物學(xué)檢測(cè)/130
一、熒光定量PCR測(cè)定病毒載量/130
二、RFLP分析HBV基因型/132
實(shí)驗(yàn)十一 基因點(diǎn)突變的分子生物學(xué)檢測(cè)/134
一、PCRRFLP檢測(cè)Nras基因點(diǎn)突變/134
二、PCR高分辨率熔解曲線法分析檢測(cè)JAK2基因點(diǎn)突變/135
主要參考文獻(xiàn)139